تخلیص و بررسی خصوصیات سینتیکی آنزیم سلنات ردوکتاز جدا شده از باکتری سویه بومی و نقش آن در حذف عناصر سمی از محیط زیست

حضور یونهای فلزات سنگین در داخل آبها و پسابهای صنعتی بدلیل سمی بودن ، یک مشکل بزرگ برای محیط زیست محسوب می شود. این آلوده کننده ها می توانند در ارگانیسمهای موجود زنده تجمع کنند و در نتیجه باعث بروز انواع بیماریها برای انسانها می شوند. جمع آوری و دفع پساب چه از نقطه نظر بهداشتی و چه از نظر اقتصادی در دیدکلان از اهمیت خاصی برخوردار بوده و انجام تصفیه و رها سازی پساب تصفیه شده و یا استفاده مجدد از پساب از موضوعات مهم جوامع صنعتی و رو به رشد می باشد. صرف نظر از چگونگی مصرف پساب تصفیه شده ، تصفیه فاضلاب را می توان از اصلی ترین و مهمترین معضلات جوامع امروزی به شمار آورد. در این میان احیای باکتریایی اکسی آنیونهای سلنیوم ( سلنات و سلنیت) به عنصر سلنیوم یک فرایند زیستی مهم در حذف آن از پساب می باشد. باکتری bacillus sp. stg-83 توسط آقای دکتر صعودی و همکارانشان از چشمه نی دشت جدا شده بود. این باکتری گرم مثبت و بی هوازی اختیاری، قادر است اکسی آنیونهای سمی و محلول سلنیوم( سلنات و سلنیت) و تلوریم( تلوریت) ر ا به فرم غیر محلول و غیر سمی سلنیوم عنصری احیا کند. در این تحقیق، آنزیم سلنات ردوکتاز و آنزیم تلوریت ردوکتاز حاصل از این باکتری تخلیص و خصوصیات سینتیکی آنها تعیین شد. مراحل تخلیص شامل رسوب با سولفات آمونیوم و روشهای کروماتوگرافی با استفاده از رزینهای سفاکریل s-200 و فنیل سفارز بود. مقدار km و vmax آنزیم سلنات ردوکتاز برای سوبسترای سلنات به ترتیب mm3/24 و µmol.min-1.mg-2/17 محاسبه شد. محدوده ph بهینه آنزیم 5/5-6 و دمای بهینه فعالیت آنزیم °c38 بدست آمد. کاتیون های mn2+ ,mg2+ ,k+ وca2+ فعالیت آنزیم را کاهش دادند. وزن مولکولی آنزیم با استفاده از کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون در حدود kda 182 تعیین شد. مقدار km و vmax برای تلوریت ردوکتاز به ترتیب mm 2/63 و µmol.min-1.mg-1 5/18 بدست آمد. آنزیم بیشترین فعالیت را در دمای °c35 و8ph= از خود نشان داد. کاتیون های یک ظرفیتی و دو ظرفیتی تاثیری بر فعالی آنزیم نداشت. با استفاده از کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون، وزن آنزیم در حدود kda 197 تعیین شد.